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lc3(小优的实验)

原创 作者:老铁  时间:2023-07-07 21:54:46 来源:体育
导语

"线粒体的自噬主要是通过PINK启动的,PINK 蛋白在健康状态下通过 PARL 的作用持续降解,而在线粒体损伤时, PARL受到抑制,PINK 稳定并招募 E3 连接酶 Parkin,以启动自噬",同事详细解释道。"有时因为LC3-I条带较浅,LC3-II/LC3-I的比值存在较大的误差,因此也有科学家用LC3-II与内参的比值进行半定量,综合考察",同事们解释道。"在哺乳动物中,存在 4种LC

lc3

在实验过程中,我们一直非常顺利,从制样、跑胶电泳、转膜、孵育、显色,到最终的结果,一切都看似顺利进行。然而,当我们期待着看到清晰的实验结果时,却发现目标位置没有出现预期的条带。这个问题让我们所有人都感到困惑,尤其是小优,她的头显得特别大。

"对哦,完全忘了这茬事了",她说道。

"转膜的时候需要使用0.22um的膜,缩短转膜的时间,40min即可",一个经验丰富的同事提醒道。

"那么,怎么做自噬呢?"小优问道。

"当LC3-I和LC3-II总量恒定时,LC3-II/LC3-I用来表示自噬的水平",另一个同事回答道。

"LC3B在脑、内分泌组织等有较高的表达,在肝脏、结肠、心肌、脾脏等基本不表达",一项研究显示。

"线粒体的自噬主要是通过PINK启动的,PINK 蛋白在健康状态下通过 PARL 的作用持续降解,而在线粒体损伤时, PARL受到抑制,PINK 稳定并招募 E3 连接酶 Parkin,以启动自噬",同事详细解释道。

"LC3A主要在大脑中表达,其他组织的表达较低",另一个同事补充道。

"以CST抗体为例,LC3B的货号有单克隆抗体# 3868和多克隆抗体#2775",他继续介绍道。

"在哺乳动物中,存在 4种LC3 同工型(LC3A、LC3B、 LC3B2和 LC3C),在不同的组织细胞中表达会有差异",同事解释道。

然而,尽管我们尝试了各种方法,但似乎问题仍然存在。一些同事建议我们尝试做LC3的WB( Western Blotting),以便观察自噬是否参与了进来。

"如果我做的样本不表达或者表达很低,我也做不出来呀",小优无奈地说道。

然而,经过一番努力,小优最终成功地做出了实验结果,这让她感到非常满意。

"有时因为LC3-I条带较浅,LC3-II/LC3-I的比值存在较大的误差,因此也有科学家用LC3-II与内参的比值进行半定量,综合考察",同事们解释道。

最后,小优成功地做出了自噬的相关实验,并且她的成果得到了大家的认可。这也让我们意识到,在进行科学研究时,耐心和坚持是非常重要的。

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