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绿色荧光蛋白(新研究发现一种热稳定的荧光蛋白为显微镜技术带来新前景)

原创 作者:老铁  时间:2022-12-23 10:32:14 来源:科技
导语

最近发表在Photochemical & Photobiosciences杂志上的一篇题为"A thermostable flavin-based fluorescent protein from Chloroflexus aggregan

绿色荧光蛋白

最近发表在Photochemical & Photobiosciences杂志上的一篇题为"A thermostable flavin-based fluorescent protein from Chloroflexus aggregans: a framework for ultra-high resolution structural studies"的新研究结果表明,该新型蛋白为荧光显微镜技术带来了新的前景。

该论文的第一作者,来自MIPT膜系统结构分析与工程实验室的Vera Nazarenko说,CagFbFP由107个氨基酸组成,分子量为11.6kDa,仅由保守的LOV核心结构域组成。这对于细胞信号传导和器官发育的研究也是有用的(包括神经科学的研究)。这种诱发的"发光"可以使用特殊的显微镜进行分析。

作者写道:"我们设计了一种分子量小的基于黄素的热稳定荧光蛋白CagFbFP,基于自嗜热细菌Chloroflexus aggans的可溶性含LOV结构域的组氨酸激酶。最重要的是,它可以在没有氧气的情况下发光。Vera Nazarenko等人的荧光显微术是一种依靠激发荧光来研究活组织的方法。虽然这些分子非常适合实验室使用,但它们确实有局限性,因为它们易高温变性,蛋白质结构庞大,并且仅在氧存在下才发光。在暴露于特定波长的激光辐射之后,一些蛋白质发射不同波长的光。"它也是微型的,而目前使用的大多数荧光蛋白体积相当大。

"我们的蛋白质比它的类似物更热稳定:它仅在68摄氏度时变性。然而现在,来自莫斯科物理和技术研究所的生物物理学家与来自法国和德国的科学家一起创造了一种新的荧光蛋白。通过将其引入细胞,它们现在可以获得关于细胞状态和凋亡的基本数据。绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。这种蛋白质最早是由下村修等人在1962年在维多利亚多管发光水母中发现。进行活细胞生化反应的研究人员长期以来一直在等待着拥有这些关键特征的蛋白质。

除了在紫外线和蓝光照射下发光外,这种新分子非常小,在高温下稳定。它易于结晶,晶体衍射至1.07ε。晶体结构和小角散射数据都表明蛋白质是二聚体。研究小组最初在嗜热细菌(即生活在高温环境中的细菌,如温泉)的细胞中发现了具有这些出色特性的蛋白质。研究人员随后对DNA序列进行了基因工程改造,复制了蛋白质的荧光

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